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近年來，腫瘤細胞免疫治療技術突飛猛進，其中 CAR-T 療法發展最為成熟，已在血液腫瘤中展現出令人驚艷的療效，為患者的治療帶來了新希望。

據弗羅斯特沙利文預計，全球CAR-T療法市場空間將由2020年的10.8億美元增長至2025年的90.5億美元，年均增速高達53%。細胞治療行業正在進入一個快速增長期。

然而，細胞治療藥物當前仍處于CMC發展初期，相關法規要求也隨著科學、工藝技術以及對于細胞治療藥物全面認知的發展而變化，病人的個體差異也對生產工藝的穩定性和一致性以及質量的可控性形成挑戰，因此CMC的復雜性和難度相對于其它生物藥更大。根據FDA披露信息顯示，細胞治療多達80%發補與CMC相關，而傳統藥物的比例為20%。單一細胞治療產品的BLA文件可達60000頁，至少是典型傳統生物制品的十倍。

如何把握細胞治療CMC重難點，加快產品上市進展？博騰生物細胞治療工藝開發助理副總經理胡迪超博士分享了他的經驗～

胡迪超 博士

博騰生物細胞治療工藝開發助理副總經理

一、可以介紹一下CAR-T的制備流程嗎？

CAR-T技術是通過基因修飾技術將能特異性識別腫瘤特異性抗原的CAR分子結構導入人體T細胞，從而形成CAR-T細胞，其能夠特異性識別腫瘤細胞，從而發揮高效殺傷腫瘤細胞而達到治療的效果。

目前上市的CAR-T產品均為自體細胞細胞治療藥物，自體CAR-T制備主要包括以下步驟： 

（1）單采血采集：首先需對患者采集單采血，此過程通常在醫院端完成。

（2）PBMC分離：利用密度梯度離心的原理，使用自動化設備分離外周血單核細胞(PBMC)。

（3）T細胞富集(可選)：使用CD4/CD8磁珠或CD3磁珠聯合自動化分離設備富集CD3+T細胞。 

（4）T細胞激活：使用CD3/CD28抗體或磁珠對靜息狀態的T細胞進行激活。 

（5）T細胞修飾：利用基因修飾技術，通常使用慢病毒轉導技術將攜帶CAR分子的基因序列投遞至T細胞的基因組中，使其可持續表達CAR分子，并裝配在T細胞表面，從而形成CAR-T細胞。

（6）CAR-T細胞擴增：為了獲得足夠量的用于QC放行檢測以及治療用的CAR-T細胞，需使用細胞培養擴增技術對CAR-T細胞進行擴增。

（7）CAR-T細胞收獲和洗滌：細胞擴增到目標數量后，使用自動化收獲設備收獲CAR-T細胞，并利用離心洗滌原理去除CAR-T生產過程中加入的生產原材料以去除工藝相關雜質。

（8）CAR-T細胞制劑和凍存：使用開發的凍存液調整CAR-T細胞密度至所需的密度，按既定的分裝體積分裝凍存袋后使用梯度降溫儀對CAR-T細胞進行凍存。

（9）CAR-T放行檢測與回輸：生產的CAR-T細胞經QC檢測合格后就可以以冷鏈的方式運輸到醫院終端，并回輸給患者發揮藥物治療作用。

CAR-T療法示例

來源：沙利文分析

二、CAR-T產品工藝復雜，在CMC工程中，最大的難點是什么？如何應對？

CAR-T細胞治療藥物與普通創新藥物在 CMC 環節有很大差異，難點主要體現在以下幾方面： 

一是，工藝的穩定性和一致性以及質量的可控性。CAR-T制備所用到的起始物料來源于donors血液中提取的T細胞。而目前已獲批的CAR-T細胞藥物均為自體CAR-T，donors為患者，個體間差異很大，從而導致CAR-T生產的起始物料差異很大，對CAR-T工藝的穩定性和一致性以及質量可控性帶來很大挑戰。而且在IND申報時，使用的是健康人donors，但在商業化階段，使用的是病人donors，這也是對工藝的一個挑戰。此外，CAR-T細胞通常使用γ-逆轉錄病毒載體或慢病毒載體進行T細胞轉導，病毒載體批間的差異也會對工藝的穩定性和一致性形成挑戰。 

二是，成本問題。目前的CAR-T細胞藥物可以說是“天價藥物”，國外定價35-50萬美元/劑，國內目前上市的兩款CAR-T細胞藥物價格也高達120萬元/劑左右。高昂的治療費用是影響藥物可及性或者說可負擔性的重要因素，因此如何降低生產成本是CAR-T產品面臨的另一個挑戰。目前來看，自體CAR-T降價空間仍然有限，但基于貨架期的通用CAR-T細胞藥物，即通用型CAR-T或異體CAR-T有很大潛力。目前通用型CAR-T尚無上市產品，但已有多個項目進入臨床研究階段。未來如果通用型CAR-T能順利獲批上市，或者在技術層面有其他突破，實現規模化生產，就有可能大幅降低成本。

當然，CAR-T產品CMC還面臨很多其他挑戰，比如說生物活性方法的開發和檢測；快速放行檢測等都還面臨挑戰。此外，通用型CAR-T還需要考慮基因編輯技術專利的問題，物料供應問題等等。

三、細胞治療藥物在中國與國際監管有何異同點？

首先從監管機構來看，目前國內外基本都實行雙軌制，在細胞產品沒有上市時，按照安慰用藥或者研究者發起的臨床研究（Investigator Initiated Trial，IIT）管理；在細胞產品作為成熟藥品上市時，按照嚴格的生物制藥法規和審批流程進行管理。

從產品的監管分類來看，美歐、日本將細胞治療設為一個專門的類別來管理。例如，美國將細胞治療藥物歸類為細胞、組織或基于細胞組織的產品管理；歐盟將細胞治療藥物歸類為先進的治療醫學藥品。在中國，目前將細胞治療藥物歸類為生物制品，并沒有單獨設立一個類別。

從監管的專業程度來看，目前中國在監管架構上和國際上有一定差異。在中國，早期曾將細胞治療作為一種醫療技術，由衛生醫院系統進行監管，近幾年才將細胞治療產品劃歸為藥品監督管理部門作為生物制品進行管理，而美國和歐洲為此額外地設立了細胞治療藥物的監管機構。

目前，細胞治療藥物技術革新較快，監管要求更新也很快，企業如何應對這種快速變化，才能讓產品順利獲批？

首先，我們要對法規進行細致的解讀，在細胞治療藥物的研發、生產過程中嚴格遵照國內外法規開展CMC活動。當然細胞治療藥物發展尚處于初期，法規也在不斷進行調整，所以我們還要及時跟進新的法規、要求。

其次，企業一定要加強GMP的意識。因為細胞治療產品的特殊性，它沒有終端除菌過濾步驟，所以從廠房的設計、設備選型、工藝研究開發，到人員都要強化GMP意識。對于一個細胞治療項目，需充分理解QbD的理念，開展充分的分子設計和成效性研究。

再次，合理的臨床設計，適應癥的選擇，規范的臨床試驗，安全性和有效性數據詳實也是獲批的重要因素。

然后，對于細胞治療的新技術，一定要與藥監部門和相關專家保持充分溝通。現在很多做新技術的可能是science背景出身，但我們也要考慮到這種新技術應用到CMC階段會不會有法規上的問題，所以對于新技術，一定要與相關的監管部門和專家保持溝通與討論。

另外，企業可以考慮與CMO/CDMO公司的深度合作。因為細胞治療產品在CMC方面比較復雜，涉及質粒、病毒、細胞等，CMO/CDMO公司有一個比較成熟的工藝生產和質量體系，而且實戰經驗比較豐富，所以biotech公司可以考慮與CMO/CDMO公司保持緊密的合作，這有助于項目順利推進和申報成功。

四、未來細胞治療藥物還有哪些發展趨勢？

CAR-T療法作為近年來熱點研發領域已為惡性血液腫瘤患者帶來了希望，例如傳奇生物的BCMA CAR-T療法西達基奧侖賽(CARVYKTI®)的總緩解率ORR高達97.9%，療效非常令人驚艷。

基于此，CAR-T療法市場規模實現持續穩定增長，未來市場潛力巨大。據弗羅斯特沙利文預計，全球CAR-T療法市場規模將由2020年的10.8億美元增長至2025年的90.5億美元，年均增速高達53%。

全球、美國及中國CAR-T療法市場規模

（2017年、2020年及2025年（估計）） 

來源：沙利文分析

目前，國內已上市的兩款CAR-T療法產品，復星凱特的阿基侖賽（奕凱達）的藥明巨諾的瑞基奧侖賽注射液（倍諾達），前者去年上市6個月銷售額1億元，后者上市3個月，已為藥明巨諾貢獻營收3079.7萬元。而今年3月獲美國FDA批準的傳奇生物的Carvykti，首個完整上市季度就完成了2400萬美元的銷售額。可見市場潛力很大。

對于細胞療法的發展趨勢，從適應癥來看，未來細胞療法在實體瘤方面有望取得突破性進展。目前CAR-T療法已在血液瘤方面取得不錯成績，而在實體瘤方面，目前尚無產品獲批上市，不過從已披露的臨床數據看來，已有產品展現出很好的治療潛力。

從技術來看，通用型細胞療法或者異體細胞療法，包括UCAR-T、CAR-NK、以及基于iPSC的細胞治療藥等，對于降低生產成本，提高藥物的可及性具有很大優勢，未來可能會有比較大的突破。

此外，隨著通用型細胞技術的發展，未來細胞生產規模也將得到大幅提升，而市場規模的增大，將進一步帶動上下游供應鏈發展從而降低成本，從而實現細胞治療藥物的成本控制，最終提高藥物的可及性。

至于降價空間，胡博認為不可預測，不過通用型細胞療法未來從百萬級降到十萬級是很有可能的，將惠及更多患者。